色譜柱為什么要進行再生？

　　色譜柱基于熔融核技術，其性能超越傳統全孔5μm和3μm色譜柱，在不增加柱壓的情況下，實現快速高效分離，可作為傳統5μm色譜柱的新型標準柱。目前，色譜柱適用范圍廣，從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離，在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學，生藥學和天然產物化學，生物物質如多肽、蛋白、核酸等多個領域發揮重要作用。

 

　　色譜柱再生：

　　當色譜柱柱壓正常，但色譜圖異常時，首先更換保護柱重新進樣觀察色譜圖，若仍然異常則判斷為色譜柱柱效下降，需要進行再生步驟。柱效下降在色譜圖上主要表現為6種，分別為峰形加寬變形、峰形變粗、嚴重拖尾、出現肩峰、峰尖分叉(雙峰)及峰形畸變。這些異常往往導致無法準確定量，對數據的準確性造成影響。

 

　　一般而言，前3種情形受到污染的情況比較輕微，經過再生即可大大提高柱效。出現第4種峰形一般是由于色譜柱受污染較為嚴重，如果是發生在初期，通過再生清洗也能夠恢復大部分柱效，如果長時間未進行處理，污染物與固定相已經牢固結合，則不能通過再生進行恢復，而只能通過清除被污染的固定相來進行修復了。出現第5種峰形一般是色譜柱柱頭塌陷所致。第6種情形是本應為單一的色譜峰卻畸變為多個色譜峰，這是污染非常嚴重造成的。柱頭塌陷和嚴重污染均不能通過再生恢復柱效，只能通過物理方法進行修復。

 

　　再生原則如下：

　　1、反相柱的再生：采用甲醇：水=95：5(V：V)，純甲醇、二氯甲烷等溶劑作流動相，順次沖洗，每種流動相經色譜柱的量為20～30倍柱體積，然后再用相反順序沖洗色譜柱。

　　2、正相柱的再生：順次用20~30倍柱體積的正己烷、異丙醇、二氯甲烷﹑甲醇作為流動相沖洗色譜柱，然后再以相反的順序沖洗色譜柱。由于異丙醇的黏度較大，沖洗時應將流速調到0.2mL/min，以免柱壓過大沖壞色譜柱。