如何才能正確使用色譜柱？

　　色譜柱是一種基于大孔徑Fused-Core技術的快速、高效型液相色譜柱。它緊密鍵合了二甲基丁基，封端，是一種非常穩定的反相柱，可用于分離蛋白等大分子物質。

 

　　應用范圍： 

　　1、pH值范圍寬：

　?、賞H＞8時，許多C18硅膠基質由于填料顆粒溶解，色譜柱內產生空隙，會過早地失去柱效。隨著鍵合相覆蓋率的增加，色譜柱壽命會延長。

　?、趐H＜2時，許多C18硅膠基質由于鍵合相的水解作用，會過早地失去柱效。使用三官能團鍵合相可獲得較佳穩定性。

　　2、高溫穩定性。

 

　　它的優勢：

　　1、更低的疏水性，適于快速分離：

　　色譜柱提供與C18和C8相似的選擇性，但保留更低。更短的鏈長和更低的疏水特性使C4成為保留和分離疏水性多肽和蛋白質的理想固定相。

　　2、具有出眾的峰形，高柱效和較高的靈敏度：

　　以同樣的高純硅膠作為基質，色譜柱能提供良好的峰形。色譜柱提供1.9μm的粒徑，以實現更快、更高效的分離。

 

　　色譜柱的使用方法：

　　1、新柱活化：新的色譜柱活化：采用100%甲醇1ml/min沖洗60min，再換成流動相進行平衡；如果流動相中含有緩沖鹽，在換成流動相前，請使用過渡流動相過渡后再換流動相平衡；

　　2、色譜柱保存溶液與評價報告一致。

　　3、在使用過程中如果流動相沒有磷酸緩沖鹽的存在，新柱子在使用之前需用100%的甲醇以0.5~1.0的流速平衡30min左右，進流動相，待系統基線平穩直接進樣即可。做完實驗再用100%的純甲醇以0.5~1.0的流速沖洗30min左右，最后用100%的純甲醇保存。

　　4、在使用過程中如果流動相有磷酸緩沖鹽的存在，新柱在使用之前需用10%的甲醇水溶液以0.5~1.0的流速沖洗60min左右，將新柱高濃度甲醇溶液置換掉，進流動相，待系統基線平穩直接進樣即可。做完實驗再用10%的甲醇（色譜純）水溶液以0.5~1.0的流速沖洗60min左右，將色譜柱中緩沖鹽溶液置換掉，最后用100%的純甲醇清洗30min，最后用純甲醇保存色譜柱。